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TECHNICAL COLUMN 常见问题
常见问题

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  • 跑电泳的过程中配的胶总会“缩”是哪些缘故呢?是有的组成成分不对的吗?
    没哪种大的问题,就会你胶里的的水分被化掉了。住宿时拿冰箱塑料袋包出来,在上面加點水保持良好对环境湿度的就能能 了;也可能性母液(30%聚丙酰胺)有大的问题,你能能已经调制一种探究;也能删除的实验免疫试剂,妥当换一 下,选取好的实验免疫试剂。
  • 左右槽缓解液有多么标准,要怎样就能达标最好特效。
    无比较特殊条件。但.我普通是上槽放剥好的响应区液,下槽能够 是反复重复在使用过两三次的响应区液。
  • 做 WesternBlot 时,同一的抵抗能力免疫性组化能得出,而WesternBlot 却不允许?
    这多数是抗体抗体阳性的问題,要说抗体抗体阳性的代表,有没有能做 WesternBlot 和抗体组化。
  • 要是 6×8 转印膜,要加多少钱一抗?
    一抗的希释度是有解释的,不同你的一抗来看看就得知了,并且但是大的膜孵育重量般最低为3- 5ml
  • 转膜后经丽春红染色法的条带,为之类大核蛋白原子的左端的转膜好象是挺好,为之类?
    那是很正常的,大脂溶性的核蛋白移动的慢,你延长了移动时段和直流电压,大脂溶性另一端也就会好的多,但有小分 子的就有着也许会变淡。
  • 测试一致免疫抗体的磷酸性反应和非磷酸性反应的抗原可能在一致张膜上吗?
    会。
  • 在做 WesternBlot 时,PVDF 膜用甲醇泡过的依据?
    PVDF 膜用甲醇泡的必要性是为了让滋养 PVDF 膜下面的正电基团,使它更简易 跟带负电的核蛋白酶质结 合,做小原子的核蛋白酶更改时再加甲醇也是这位必要性。
  • 免疫检测组化和WesternBlot 是可以用同其中一种抗体阳性吗?
    表面抗原阳性组化时表面抗原阳性认别的是未作变形操作的抗原而定簇(又叫做表位),些许表位是非直线的,而有的属 于构象型;非直线表位没受蛋清变形的关系,天然水蛋清和煮后的蛋清都富含;构象型表位鉴于受蛋清位置 的结构影响,煮后变形会会消失。要是你所配的表面抗原阳性认别的是蛋清上间断的多少氨基,也就算非直线表位, 特别一些表面抗原阳性可一起用作表面抗原阳性组化和Western,而要是表面抗原阳性认别构象形表位,则智能用作表面抗原阳性组化。
  • 要做磷硝化作用某要素 WesternBlot,二是抗有无条件?
    对二抗无让,要看实验性状态来取舍,普遍推建用HRP 图标的二抗。
  • WesternBlot 中抵抗能力的能够 抄袭APP吗?
    抗原阳性运转硫酸铜溶液通常情况不主范永久存放致使多次应用,因为如抗原阳性更加难得,可致使多次应用2-3 次。溶解稀释 后应在 2-3 天内应用,4 度存放,应对致使多次冻融。
  • 一抗,二抗的比倒是否是核心?
    相当首要,调控好一抗,二抗的基数,行清除组成部分非特异的本底。
  • 蛋清的上样量有木有有啥子实际的想要?
    上样量要跟据实验操作的需求定出, 一旦需求是酶联免疫法和半酶联免疫法的WesternBlot 则上样量要匀称等,如 果只不过要定量分析,则就没有太大了的的联系,否则多上够了了,并且不会超载超限。
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