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Cell Biolabs:Cas9蛋白ELISA检测试剂盒

发布者:艾美捷科技    发布时间:2021-10-27     
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CRISPR/Cas是人体细胞长远超级进化进行的RNA引导的挥发袭击病毒有哪些或噬菌体DNA的转变性抗体抗体力检测软件。基于Cas人类基因核心内容电子器件队列的各个,CRISPR/Cas抗体抗体力检测软件被划分3种方式:I型、Ⅱ型和Ⅲ型。I型和Ⅲ型CRISPR/Cas抗体抗体力检测软件需多家Cas蛋清进行塑料体切除DNA双链,而Ⅱ型CRISPR/Cas抗体抗体力检测软件只需一Cas9蛋清来切除DNA双链,当今Ⅱ型软件是被整改的而言获得成功的人工服务核酸酶。 

CRISPR/Cas.jpg

 Ⅱ型CRISPR/Cas天然免疫设备以Cas9蛋清和向导RNA为关键,在这当中Cas9蛋清是1种DNA内切酶,当短链外源DNA转型在CRISPR人类染色体组组中,转录处理成CRISPR RNA(CrRNA),这一些CrRNA参入反式调空激活开通CrRNA(tracrRNAs),引流Cas9蛋清特女性朋友位点分割DNA。虽然,较近有探索感觉,这几种RNA应该被“改装内饰”成一两个向导RNA(single-guide RNA,SgRNA),可引流Cas9蛋清无误自动识别并切开指定区域回文序列,为CRISPR-Cas9人类染色体组编写技能广泛APPAPP尊定基础知识。以至于,Cas9 蛋清是1种人类染色体组组编写产品在 DNA 中导致指定点双链破裂,遭遇了世界最级的喜爱。 

如何快速有效的实现Cas9蛋白的定量检测,作为专业的生命科学医药原料供应商,Cell Biolabs中国区金牌代理,艾美捷科学为您推荐:Cas9蛋白ELISA检测试剂盒,实现Cas9蛋白的定量检测。

 
货号PRB-5079
名称Cas9 (CRISPR Associated Protein 9) ELISA Kit
Cas9蛋白ELSIA定量检测试剂盒
检测灵敏度酿脓链球菌的Cas9蛋白检测极限为1.5 ng/mL
实验原理本试剂盒用于测量各种细胞和组织裂解液样本中酿脓链球菌的Cas9蛋白的含量。试剂盒提供包被有抗Cas9蛋白抗体的96孔板,在使用该试剂盒的测定中,样品中的Cas9蛋白牢固且稳定地结合在孔上。然后加入生物素标记的Cas9蛋白检测抗体和显色剂进行识别并显色。Cas9的比例与吸光度的强度成比例。Cas9的绝对量可以通过与Cas9标准品进行比较来量化。
说明书
 Cas9血清ELSIA按量判断制剂盒检测的结果:

 Cas9标准曲线.png

1. Cas9标准曲线

 

转染的293细胞中检测Cas9.png

图2. 在转染的293细胞中检测Cas9。用Cas9哺乳动物表达载体瞬时转染细胞。48h后,细胞在RIPA缓冲液中裂解,测定Cas9蛋白浓度。用Cas9 ELISA试剂盒分别检测无细胞裂解液样本 (Neg)、存在50ng/mL Cas9蛋白(Pos)样本、转染对照(mock转染)蛋白裂解液以及Cas9转染的裂解液。


纯化的重组Cas9蛋白.png

图3. 纯化重组Cas9蛋白泳道1:SeeBlue Plus2 MW标准品;泳道2:重组Cas9。纯化的重组Cas9蛋白用作免疫原以产生ELISA抗体。

 

重组的Cas9蛋白的序列(下划线部分是Cas9蛋白全长):

MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMASMTGGQQMGRGSEFELRRQACGRMDKKYSIGLDIGTNSVGWAVITD EYKVPSKKFKVLGNTDRHSIKKNLIGALLFDSGETAEATRLKRTARRRYTRRKNRICYLQEIFSNEMA KVDDSFFHRLEESFLVEEDKKHERHPIFGNIVDEVAYHEKYPTIYHLRKKLVDSTDKADLRLIYLALA HMIKFRGHFLIEGDLNPDNSDVDKLFIQLVQTYNQLFEENPINASGVDAKAILSARLSKSRRLENLIA QLPGEKKNGLFGNLIALSLGLTPNFKSNFDLAEDAKLQLSKDTYDDDLDNLLAQIGDQYADLFLAAKN LSDAILLSDILRVNTEITKAPLSASMIKRYDEHHQDLTLLKALVRQQLPEKYKEIFFDQSKNGYAGYI DGGASQEEFYKFIKPILEKMDGTEELLVKLNREDLLRKQRTFDNGSIPHQIHLGELHAILRRQEDFYP FLKDNREKIEKILTFRIPYYVGPLARGNSRFAWMTRKSEETITPWNFEEVVDKGASAQSFIERMTNFD KNLPNEKVLPKHSLLYEYFTVYNELTKVKYVTEGMRKPAFLSGEQKKAIVDLLFKTNRKVTVKQLKED YFKKIECFDSVEISGVEDRFNASLGTYHDLLKIIKDKDFLDNEENEDILEDIVLTLTLFEDREMIEER LKTYAHLFDDKVMKQLKRRRYTGWGRLSRKLINGIRDKQSGKTILDFLKSDGFANRNFMQLIHDDSLT FKEDIQKAQVSGQGDSLHEHIANLAGSPAIKKGILQTVKVVDELVKVMGRHKPENIVIEMARENQTTQ KGQKNSRERMKRIEEGIKELGSQILKEHPVENTQLQNEKLYLYYLQNGRDMYVDQELDINRLSDYDVD HIVPQSFLKDDSIDNKVLTRSDKNRGKSDNVPSEEVVKKMKNYWRQLLNAKLITQRKFDNLTKAERGG LSELDKAGFIKRQLVETRQITKHVAQILDSRMNTKYDENDKLIREVKVITLKSKLVSDFRKDFQFYKV REINNYHHAHDAYLNAVVGTALIKKYPKLESEFVYGDYKVYDVRKMIAKSEQEIGKATAKYFFYSNIM NFFKTEITLANGEIRKRPLIETNGETGEIVWDKGRDFATVRKVLSMPQVNIVKKTEVQTGGFSKESIL PKRNSDKLIARKKDWDPKKYGGFDSPTVAYSVLVVAKVEKGKSKKLKSVKELLGITIMERSSFEKNPI DFLEAKGYKEVKKDLIIKLPKYSLFELENGRKRMLASAGELQKGNELALPSKYVNFLYLASHYEKLKG SPEDNEQKQLFVEQHKHYLDEIIEQISEFSKRVILADANLDKVLSAYNKHRDKPIREQAENIIHLFTL TNLGAPAAFKYFDTTIDRKRYTSTKEVLDATLIHQSITGLYETRIDLSQLGGDGGSGPPKKKRKVYPYDVPDYAC

 最近使用期刊论文:1、Van Cleemput, J. et al. (2021). CRISPR/Cas9-Constructed Pseudorabies Virus Mutants Reveal the Importance of UL13 in Alphaherpesvirus Escape from Genome Silencing. J Virol. 95(6):e02286-20. doi: 10.1128/JVI.02286-20.2、Lee, M.H. et al. (2021).  Cellular reprogramming with multigene activation by the delivery of CRISPR/dCas9 ribonucleoproteins via magnetic peptide-imprinted chitosan nanoparticles. Mater Today Bio. 9:100091. doi: 10.1016/j.mtbio.2020.100091. 看清楚在此,您钟情吗?尽快关系小艾吧!
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